Корзина

Корзина пуста.

Центрифугирование проб крови

Центрифугирование – отделение жидкой части крови (сыворотки, плазмы) от клеток (эритроцитов, тромбоцитов, лейкоцитов), которое применяется с целью подготовки биоматериала для последующего проведения различных анализов. Выполняется с помощью специального лабораторного оборудования – центрифуги.

Центрифугирование проб крови

Правила центрифугирования крови

Чтобы исключить возможность повреждения пробирок во время центрифугирования и получить качественный биоматериал для дальнейшего исследования, необходимо соблюдать определенные правила.

  • Во время центрифугирования на каждое «плечо» ротора центрифуги должна приходиться одинаковая нагрузка. Для этого лаборант перед началом процесса центрифугирования должен убедиться, что вакуумные пробирки, стаканы для них, вкладыши, устанавливаемые на каждое «плечо», имеют одинаковую форму, величину и вес.
  • Если центрифугированию подлежат пробирки с разным объемом крови, то необходимо в симметрично расположенные гнезда на противоположных «плечах» ротора устанавливать одинаковые по весу пары пробирок. Если пробирок с одинаковым объемом крови недостаточно, достичь симметрии можно установив в пустое гнездо пробирку с аналогичным объемом воды.
  • Устанавливая вакуумные пробирки в стаканы для центрифугирования, следует обращать внимание на то, чтобы крышка пробирки не соприкасалась со стенками стакана.
  • Проводить центрифугирование пробирок с разделительным гелем нужно при температуре 24 °C. После формирования разделительного барьера пробирки нельзя подвергать повторному центрифугированию.

Режимы центрифугирования крови

Центрифугированию подвергаются различные пробы крови (с добавлением цитрата, гепарина, разделительного геля), забираемые для разных целей. Для каждого вида проб существует свой режим центрифугирования, соблюдение которого гарантирует, что биоматериал для анализа будет подготовлен должным образом – клетки не повредятся, отцентрифугируется достаточный объем плазмы или сыворотки.

Режимы центрифугирования для разных проб крови стандартизированы и должны быть представлены в виде инструкции, содержащей следующие параметры:

  • тип центрифуги;
  • температура, при которой выполняется центрифугирование;
  • величина центробежной силы (ВЦС), обеспечивающей разделение компонентов крови в заданных условиях;
  • длительность центрифугирования.

Рекомендации по времени центрифугирования и ВЦС для различных типов пробирок

Величина центробежной силы (g) – один из основных параметров, на которые следует ориентироваться при выборе оптимальных условий центрифугирования. Обычно к паспорту центрифуги прикладывается таблица, в которой указана связь между скоростью вращения ротора (число оборотов в минуту) и ВЦС. Если она отсутствует, g можно рассчитать по следующей формуле:

g=1,118*0,00001*r*n2, где:

  • r – радиус центрифуги (расстояние в см между осью ротора и центром пробирки в гнезде центрифуги);
  • n – число оборотов в минуту.

Существуют общие рекомендации по времени центрифугирования и относительной центробежной силе (ОЦС) для разных типов вакуумных пробирок.

Тип пробиркиРекомендуемая ОЦС, gРекомендуемое время центрифугирования, мин.
Для исследований сыворотки130010
Для исследований сыворотки с разделительным гелем1500-200010
Для исследований плазмы с гепарином130010
Для исследований плазмы с гепарином и разделительным гелем1500-200010
С цитратом натрия для получения плазмы2000-250015
Для исследования глюкозы130010

Однако разные производители могут давать свои рекомендации с учетом особенностей расходных материалов, которые используются для изготовления вакуумных пробирок.

Центрифугирование крови

Возможные проблемы при центрифугировании крови для получения сыворотки

ПроблемаПричиныДопущенные ошибкиСпособ предотвращения
Недостаточное разделение сыворотки и сгустка кровиСыворотка отделилась слабо или не полностью, при этом барьер между сывороткой и сгустком не поврежден и хорошо определяетсяЧастичная или замедленная коагуляция, Неполное смешивание активатора свертывания и кровиПробирка перевернута меньше 5-6 раз после взятия кровиПеревернуть пробирку с кровью 5-6 раз сразу после заполнения
Недостаточная выдержка биоматериала перед центрифугированиемНе соблюден рекомендуемый период (около 30 минут) перед центрифугированиемСоблюдать время отстаивания пробирки с кровью перед центрифугированием
Низкая скорость центрифугированияУскорение при центрифугировании меньше необходимого минимумаУбедиться в правильности заданных параметров
Неровный, плохо сформированный барьер, нечеткая граница отделения сыворотки.Недостаточное время центрифугированияЦентрифугирование закончено раньше необходимого времениПри необходимом уровне нагрузки центрифугировать пробирку нужно не менее 10 минут
Использование рефрижераторной центрифугиНизкая температура центрифугированияУстановка температуры в пределах от 20 до 24 °C, термическая изоляция пробирки от центрифуги и ротора
Нарушена целостность пробиркиНагрузка при центрифугировании превысила допустимый предел конструктивной устойчивости пробиркиПревышение допустимых норм нагрузкиНедопущение превышения предела нагрузки
Не выставлен уровень центрифуги, наличие посторонних предметов в ротореПеред запуском не проверен уровень ротора, отсутствуют амортизирующие подложки под пробиркуУстановка амортизирующих прокладок центрифуги и ротора, устранение посторонних предметов из полости центрифуги
Внутри сепарационного барьера наблюдаются клеточные конгломератыЗамедленная либо неполная коагуляция, неполное смешивание активатора свертывания и кровиПробирка перевернута меньше 5-6 раз после взятия кровиПеревернуть пробирку с кровью 5-6 раз сразу после забора
Недостаточное время коагуляции перед центрифугированиемНе соблюден рекомендуемый период (около 30 минут) перед центрифугированиемВремя отстаивания пробирки перед центрифугированием должно быть не менее 30 минут
В сыворотке крови присутствует фибринИзбыточная нагрузка при центрифугированииУскорение при центрифугировании превысило допустимую нормуСоблюдать рекомендуемую норму ускорения
Замедленная либо неполная коагуляция, неполное смешивание активатора свертывания и кровиПробирка перевернута недостаточное количество раз (5-6) после взятия кровиПеревернуть пробирку с кровью 5-6 раз сразу после забора
Недостаточное время коагуляции перед центрифугированиемНе соблюден рекомендуемый период (около 30 минут) перед центрифугированиемЦентрифугировать биоматериал не ранее, чем через полчаса после взятия
Ошибка в результатах исследованияНизкое качество сыворотки вследствие гемолизаСлишком жесткое встряхивание либо перемешивание кровиОсторожное обращение с пробирками с биоматериалом, мягкое встряхивание или перемешивание
Избыточное ускорение при центрифугированииУскорение при центрифугировании превысило допустимую нормуСоблюдать рекомендуемую норму ускорения

Вам понравилась статья? Поделитесь ссылкой на материал в социальных сетях, возможно, информация окажется полезной для ваших друзей и коллег.